ערכת גילוי נוגדנים למחלות בורסות זיהומיות ELISA
מספר דגם: VD501E
ראשי תיבות:IBDV Ab Elisa
דגימה: סרום
תיאור
מִפרָט
IBDV אב אליסה
שימוש מיועד:
ערכת איתור ELISA לווירוס זיהומיות משמשת לקביעת נוגדני נגיף המחלה זיהומית בסרום עוף במבחנה.
דוּגמָה:נַסיוֹב
חומרים שסופקו:
נהלי בדיקה ופרשנות
שלב 1 נוהל בדיקה
1.1 הכנת תמיסת כביסה
נוזל כביסה בריכוז עבודה: לפני השימוש, יש להחזיר את תמיסת הכביסה לטמפרטורת החדר (20-25 מעלות) ולנער אותה בצורה אחידה. לאחר מכן יש לדלל פי 20 את תמיסת הכביסה המרוכזת במים מטוהרים (לדוגמה, 5 מ"ל תמיסת כביסה מרוכזת מתווספת ל-95 מ"ל מים מטוהרים), מערבבים היטב, ונוזל הכביסה המדולל ניתן לאחסן ב-2-8 מעלות למשך 7 ימים.
1.2 הכנת דוגמא
① דם מלא של בעלי חיים נלקח, צנטריפוגה ב-4000 סל"ד למשך 10 דקות, והסופרנטנט נאסף. ניתן גם להקריש סרום באופן טבעי ללא המוליזה.
②יש לדלל את הסרום לבדיקה 25 פעמיםבצלחת דילול הסרום (לדוגמה:הוסף 6 ul של סרום לבדיקה ל-144 ulחומר דילול לדוגמא).
הערה: אין צורך לדלל בקרות שליליות וחיוביות.
1.3 נוהל בדיקה
①קח את תווית האנזים Microplate (בהתאם למספר הדגימות, ניתן לפרק ולהשתמש בו מספר פעמים), הוסף 100ul מהסרום המדולל לתווית האנזים Microplate, הגדר שתי בארות כל אחת לבקרה שלילית ובקרה חיובית, והוסף 100ul לבאר התגובה בהתאמה. נער בעדינות את הדגימה בבאר, תוך שימוש בסרט צלחת האטימה כדי לכסות את הצלחת, ודגירה ב-37 מעלות למשך 30 דקות.
②פתח את סרט צלחת האיטום, לנער את התמיסה בצלחת, להוסיף 300µl של נוזל כביסה בריכוז עבודה לכל באר, ולאחר מכן להשליך את הנוזל בבאר. חזור על השלבים לעיל 5 פעמים, ולבסוף יבש על נייר סופג נקי.
③ הוסף 100 µl של צמוד אנזים לכל באר, כסה את הצלחת ודגירה ב-37 מעלות למשך 30 דקות.
④פתח את סרט צלחת האיטום, לנער את התמיסה בצלחת, להוסיף 300 µl של נוזל כביסה בריכוז עבודה לכל באר, ולאחר מכן להשליך את הנוזל בבאר. חזור על השלבים לעיל 5 פעמים, ולבסוף יבש על נייר סופג נקי.
⑤ הוסף תמיסת מצע של 100µl לכל באר, כסה את הצלחת ודגירה במשך 10 דקות ב-37 מעלות הרחק מאור.
⑥ הוסף תמיסת עצירה של 50µl לכל באר וקבע את התוצאה תוך 5 דקות.
שלב 2 פרשנות התוצאה
ערך OD450 של כל באר נקרא על קורא המיקרו-לוחים עם 96 בארות.
2.1 אימות
הערך הממוצע של OD450nm של בקרה שלילית היה < 0.15, וערך OD450nm הממוצע של ביקורת חיובית / ערך OD450nm הממוצע של בקרה שלילית היה גדול או שווה ל-3.5, תוצאות הניסוי היו תקפות. אחרת, יש לחזור על הבדיקה.
2.2 שיטת חישוב
עבור כל מדגם, חשב את ה-S/P באופן הבא באמצעות ערכי המדגם והבקרה המתוקנים:
S / P=(ODלִטעוֹם-ODNC) / (ODPC-ODNC)
2.3 פרשנות התוצאה
כאשר S/P < 0.3, הוא נחשב שלילי.
כאשר S/P > 0.35, הוא נחשב חיובי.
כאשר 0.3 פחות או שווה ל-S/P פחות או שווה ל-0.35, זה נחשב חשוד, ומציע לחזור על הדגימה ולבדוק שבוע לאחר מכן.
תגיות פופולריות: ערכת גילוי נוגדנים למחלה זיהומית לנגיף elisa, סין ערכת גילוי נוגדנים למחלה זיהומית elisa ספקים, יצרנים, מפעלים
זוג: לא
הבא: לא
